臨床ビネット
65歳男性の症例。リンパ球増加症を呈しています。末梢全血サンプルで、ClearLLab 10C*パネルを使用したフローサイトメトリーによるイムノフェノタイピングを行いました。
フローサイトメトリーによるイムノフェノタイピング
B 細胞チューブ
Figure 1. このCD45と側方散乱光のドットプロットは、「Cells」ゲート内のイベントを示しています。このプロットでは、CD45陽性としてゲートされた白血球のさまざまなサブセットが区別して表示されています。 CD45陰性集団には通常、赤血球、血小板凝集体、組織破片、または非造血細胞が含まれます。
Figure 2. このCD19と側方散乱光のドットプロットは、「Cells」ゲート内のイベントを示しています。 CD19+ゲート内にあるのは、CD19陽性細胞です。 CD19は、成熟B細胞および未熟B細胞、そして、ほとんどの形質細胞で発現しています。 CD19陽性細胞の側方散乱光の強度は、通常、低～中程度です。このサンプルでは、CD19陽性B細胞の数が相対的に増加していることに注意してください。
Figure 3. このLambdaとKappa ドットプロットは、すべてのCD19陽性細胞を示しています。正常な成熟B細胞はポリクローナルで、kappaまたはlambda軽鎖のどちらかを発現しており、その比率は1.4（1〜2の範囲）です。 CD19陽性細胞（オレンジ）の大部分で、正常な成熟B細胞に比べて表面lambda軽鎖の発現量が減少していることから、クローン性B細胞集団であることが示唆されます。 kappaおよびlambda軽鎖が正常レベルで発現しているポリクローナルB細胞（オレンジ）の小ポピュレーションも存在しています。
Figure 4. このCD38とCD10のドットプロットは、リンパ球ゲート（Ly）内のすべての細胞を示しています。
CD38は、血漿細胞で最も高レベル、未成熟B細胞では中レベル、胚中心B細胞では低レベルで発現します。ほとんどの成熟B細胞において、CD38の発現量は低いか、発現していません。 T細胞（赤）は、活性化の状態によってCD38の発現量が異なります。クローン性B細胞集団（オレンジ）はCD38発現が低いか陰性で、CD10も陰性です。
Figure 5. このCD20とCD10のドットプロットは、リンパ球ゲート（Ly）内のすべての細胞を示しています。ほとんどの成熟B細胞は、CD20を均一かつ高レベルに発現します。クローン性B細胞集団（オレンジ）ではCD20の発現が低下し、CD10は発現していません。CD20が正常に発現している小さな集団（オレンジ、右下）が、正常B細胞です。
Figure 6. このCD19とCD5のドットプロットは、リンパ球ゲート（Ly）内のすべての細胞を示しています。 CD5はT細胞で発現し（右上の赤）、正常な成熟B細胞では低レベルで発現し、腫瘍性B細胞のいくつかのサブタイプに発現します。クローン性B細胞集団（オレンジ）はCD5とCD19を発現しています。 CD19が正常に発現し、CD5発現が低いか欠損している小さな集団（右下のオレンジ）は、正常B細胞です。
Figure 7. このCD20とCD200のドットプロットは、リンパ球ゲート（Ly）内のすべての細胞を示しています。ほとんどの成熟B細胞はCD200を低～中レベルで発現します。クローン性B細胞集団（オレンジ）はCD200陽性でCD20が減少しています。 CD20とCD200が正常に発現している小さな集団（右側のオレンジ）は正常B細胞です。
Figure 8. このCD5とCD200のドットプロットは、リンパ球ゲート（Ly）内のすべての細胞を示しています。ほとんどの成熟B細胞は通常CD200を発現しますが、CD5の発現はサブセットによって異なります。慢性リンパ性白血病/小リンパ球性リンパ腫の腫瘍性B細胞はCD5とCD200を発現します。マントル細胞リンパ腫でCD5は発現しますがCD200は発現しません。クローン性B細胞集団（オレンジ）はCD5およびCD200が陽性であるため、慢性リンパ性白血病／小リンパ球性リンパ腫と考えられます。
フローサイトメトリーのドットプロットをすべて表示するには、下のリンクからPDF形式でこのケースをダウンロードしてください。
フローサイトメトリーによるイムノフェノタイピングの結果
フローサイトメトリーによるイムノフェノタイピングで、表現型の異なる細胞集団（CD5：中～高、CD19：中、CD20：低～中、CD38：低～欠損、CD45：高、CD200：中、 lambda 軽鎖：弱、CD10およびその他のTマーカーおよび骨髄マーカー：欠損）が同定されました。正常なB細胞と比較すると、CD5の発現、CD20発現の減弱、lambda軽鎖の弱い発現が認められます。
以上を総合すると、異常集団の免疫表現型は慢性リンパ性白血病／小リンパ球性リンパ腫（CLL/SLL）と最も一致しています。 FISH法は、CLL/SLL患者のサブセットに見られる異常である13q染色体の欠失を検出します。ですが、現在のWHO基準を使用したCLL／SLLの確定診断では、疾患に関連する臨床所見や検査所見があること、または末梢血中に5,000／µL以上の腫瘍細胞が存在していることを示さなければなりません。したがって、診断には臨床データと検査データとの相関が推奨され、それにイムノフェノタイピング所見を加え総合的に判断します。
*研究用試薬です。診断用には使用できません。
*解析ファイルの表示には、KaluzaまたはKaluza Cが必要です
