臨床ビネット
66歳女性の症例。末梢血塗抹標本に非定型細胞が認められます。末梢全血サンプルで、ClearLLab 10C*パネルを使用したフローサイトメトリーによるイムノフェノタイピングを行いました。
フローサイトメトリーによるイムノフェノタイピング
T 細胞チューブ
Figure 1. このCD45と側方散乱光のドットプロットは、「CD45+」ゲート内のイベントを示しています。このドットプロットでは、末梢血、骨髄、リンパ節サンプルに典型的に見られる白血球である、リンパ球(Lyゲート、赤/アクア)、単球(Moゲート、緑)、顆粒球(Grゲート、青)が区別して表示されています。 CD45 dimゲート(紫)内の領域は、通常、骨髄芽球と未成熟B細胞が占有しています。好塩基球、形質細胞、NK細胞もこの領域に現れることがあります。各ゲートを構成するイベントに異なる色を適用することで、全体の解析からさまざまな集団を識別できます。リンパ球の数が相対的に増加していることに注意してください(赤/アクア)。
Figure 2. このCD3と側方散乱光のドットプロットはすべて、生細胞を示しています。 CD3+ゲートは表面にCD3を発現している細胞(アクア)を同定します。 CD3はT細胞に対して非常に特異的であり、成熟T細胞と後期の未成熟T細胞の表面にのみ発現します。 CD19陽性細胞の側方散乱光の強度は、通常、低~中程度です。ほとんどのリンパ球はCD3陽性T細胞(アクア)です。
Figure 3. このCD5とCD3のドットプロットは、リンパ球ゲート(Ly)内のすべての細胞を示しています。ほとんどの成熟T細胞(アクア)がCD3とCD5を共発現していますが、大型顆粒リンパ球性白血病の形態を呈する細胞傷害性T細胞のサブセットでは、CD5の発現が減少、または欠損していることもあります。 CD5は、ほとんどのNK細胞(赤)で発現していません。 CD5の発現は、T細胞のサブセットで減少します。
Figure 4. このCD7とCD2のドットプロットは、リンパ球ゲート(Ly)内のすべての細胞を示しています。 CD2とCD7は、大多数の成熟T細胞(アクア)とNK細胞(赤)で共発現しています。 CD2とCD7は、T細胞のサブセットで減少します。
Figure 5. このCD8とCD4のドットプロットは、リンパ球ゲート(Ly)内のすべての細胞を示しています。 CD3陽性T細胞(アクア)には、CD4陽性(ヘルパーT細胞)とCD8陽性(細胞傷害性T細胞)も含まれます。 CD4陽性T細胞は、通常、CD8陽性T細胞よりも多く、末梢血でのCD4とCD8との比率は、1:1~4:1です。まれに、CD4とCD8の二重陰性または二重陽性T細胞も存在します。二重陰性T細胞は、通常、ガンマ・デルタT細胞です。 CD4陽性かつCD3陰性の細胞(赤、中央左)は、リンパ球ゲート内の単球であることに注目してください。このことから、CD45とサイド散乱光のゲーティングだけでは、純粋なリンパ球の同定ができないことがわかります。 CD8陽性T細胞は比例的に増加しています。
Figure 6. このCD2とCD8のドットプロットは、リンパ球ゲート(Ly)内のすべての細胞を示しています。 CD8陰性T細胞(右下の青)と比較して、CD8陽性T細胞(右上の青)の大部分で、CD2の発現が異常に低下しています。
Figure 7. このCD5とCD8のドットプロットは、リンパ球ゲート(Ly)内のすべての細胞を示しています。 CD8陰性T細胞(青、右下)と比較して、CD8陽性T細胞(青、上)の大部分で、CD5の発現が異常に低下しています。
Figure 8. このCD7とCD8のドットプロットは、リンパ球ゲート(Ly)内のすべての細胞を示しています。 CD8陰性T細胞(青、右下)と比較して、CD8陽性T細胞(青、上)の大部分で、CD7の発現が異常に低下しています。
フローサイトメトリーのドットプロットをすべて表示するには、下のリンクから、PDF形式でこのケースをダウンロードしてください。
フローサイトメトリーによるイムノフェノタイピングの結果
フローサイトメトリーによるイムノフェノタイピングで、表現型の異なる細胞集団(CD2:様々な強度での発現、CD3:中程度の発現、CD5:様々な強度での発現、CD7:様々な強度での発現、CD8:強く発現、CD45:強く発現、CD56:低く発現)が同定されています。この集団には、CD16を発現している可能性が高いサブセットが含まれます。正常な成熟T細胞と比較すると、CD16とCD56の発現量の増加とともに、CD2、CD5、CD7の発現減弱が認められます。
異常集団の免疫表現型は、T細胞大型顆粒リンパ球性白血病と一致しています。持続的で未説明の血球減少症は、臨床的に適切な状況において、大型顆粒リンパ増殖異常症の所見と一致します。
*研究用試薬です。診断用には使用できません。
*解析ファイルの表示には、KaluzaまたはKaluza Cが必要です