臨床ビネット
末梢血中に芽球を認める51歳男性の症例。骨髄サンプルで、ClearLLab 10C*パネルを使用したフローサイトメトリーによるイムノフェノタイピングを行いました。
フローサイトメトリーによるイムノフェノタイピング
M1 細胞チューブ
Figure 1. このCD45と側方散乱光のドットプロットは、「CD45+」ゲート内のイベントを示しています。このドットプロットでは、末梢血、骨髄、リンパ節サンプルに典型的に見られる白血球である、リンパ球(Lyゲート、赤)、単球(Moゲート、緑)、顆粒球(Grゲート、青)が区別して表示されています。CD45 dimゲート(紫)内の領域は、通常、骨髄芽細胞と未成熟B細胞が占有しています。好塩基球、形質細胞、NK細胞もこの領域に現れることがあります。各ゲートを構成するイベントに異なる色を適用することで、全体の解析からさまざまなポピュレーションを識別できます。前駆体(紫)と単球(緑)の数が相対的に増加していることに注意してください。
Figure 2. このCD13とCD34のドットプロットは、すべて生細胞を示しています。 CD13は成熟顆粒球、単球、好塩基球、およびCD34陽性前駆体で発現します。 CD34は初期造血前駆体で発現しています。 CD13はCD34陽性B細胞前駆体または成熟リンパ球細胞ではあまり発現していません。前駆体(紫)と単球(緑)はCD13を発現しますが、CD34は発現しません。
Figure 3. このCD14とCD64のドットプロットは、すべて生細胞を示しています。 CD64は、単球では高レベルで、成熟顆粒球では低レベルで発現します。 CD14は成熟単球では高レベルで発現し、成熟顆粒球では低レベルで発現します。未成熟単球は、高いレベルでCD64を発現していますが、CD14は欠損しています。成熟単球への成熟期に高レベルのCD64発現を維持しながら、徐々にCD14を獲得します。未成熟顆粒球は、中程度のレベルでCD64を発現していますが、CD14は発現しません。成熟顆粒球への移行時にCD14を獲得し、CD64を失います。前駆体(紫)はCD14およびCD64を発現しませんが、単球(緑)はCD64を高いレベルで発現し、小さなサブセットではCD14を様々なレベルで発現しています。
Figure 4. このCD7とCD13のドットプロットは、すべて生細胞を示しています。 CD7はT細胞とNK細胞に発現しています。 CD13は成熟顆粒球、単球、好塩基球、およびCD34陽性前駆体で発現します。 CD13とCD7の共発現は、概ね、認められません。前駆体(紫)は1つのサブセットでCD7を発現し、CD13を中程度に発現しています。単球(緑)はCD7をごくわずかに発現し、CD13を様々な量で発現しています。
M2 細胞チューブ
Figure 5. このCD34とCD117のドットプロットは、すべて生細胞を示しています。CD34は骨髄芽球および初期の未熟B細胞前駆体に発現しています。 CD117は骨髄芽球、前骨髄細胞、初期赤血球前駆体に発現していますが、初期B細胞前駆体には発現していません。前駆体(紫)はCD117を発現していますが、CD34は発現していません。単球(緑)はCD34、CD117のどちらも発現していません。
Figure 6. このCD33とCD13のドットプロットは、すべて生細胞を示しています。 CD33とCD13は、単球、成熟顆粒球、好塩基球、およびCD34陽性前駆体で発現しています。単球では、CD33が高いレベルで均一に発現していますが、CD13の発現量は様々です。未成熟顆粒球は、成熟顆粒球よりもCD33の発現量が多く、CD13の発現は低いです。リンパ球はCD13およびCD33(赤)をほとんど発現していません。前駆体(紫)はCD33を強く発現し、CD13を中程度に発現しています。単球(緑)は、CD33を強く発現していますが、CD13の発現は弱~中程度です。
Figure 7. このHLA-DRとCD34プロットは、すべて生細胞を示しています。 HLA-DRは、B細胞、単球、形質細胞様樹状細胞、およびCD34陽性前駆体上に発現しています。CD34は初期の前駆体に発現しています。初期の前駆体は、CD34とHLA-DRの両方を様々なレベルで発現しています。HLA-DRの発現量が最も多いのは、初期の単球です。前駆体(紫)と単球(緑)は中~高レベルのHLA-DRを発現していますが、CD34は発現していません。
Figure 8. このHLA-DRとCD15のドットプロットは、すべて生細胞を示しています。 CD15は成熟顆粒球と単球で発現しています。 HLA-DRは、B細胞、単球、形質細胞様樹状細胞、およびCD34陽性前駆体上に発現しています。成熟顆粒球は、CD15を有する最も初期の形態を除き、HLA-DR(青)を発現していません。 CD34陽性の骨髄前駆細胞はHLA-DRを発現していますが、CD15の発現は一過性です。前駆体(紫)はHLA‐DRを中~強く発現していますが、CD15は発現していません。単球(緑)はHLA‐DRを中~強く発現し、CD15を弱く発現しています。
フローサイトメトリーのドットプロットをすべて表示するには、下のリンクから、PDF形式でこのケースをダウンロードしてください。
フローサイトメトリーによるイムノフェノタイピングの結果
フローサイトメトリーによるイムノフェノタイピングで、表現型の異なる2つの細胞集団が同定されています。1つ目は、前駆体(CD4:中程度で発現、CD7:1つのサブセットで弱く発現、CD13:中程度で発現、CD33:強く発現、CD38:中程度で発現、CD45:弱く発現、 CD117:低~中程度で発現、CD123:中程度で発現、HLA-DR:中~強く発現、CD14、CD15、CD34、CD64およびその他のリンパ系抗原または骨髄系抗原:欠損)です。正常なCD34陽性前駆体と比較すると、CD7の発現、CD33の発現の増加、およびCD34の欠損が認められます。2つ目の集団は単球(CD4:中程度で発現、CD11b:強く発現、CD13:弱~中程度で発現、CD14:小さなサブセットで弱~中程度で発現、CD15:弱く発現、CD33:強く発現、CD38:中程度で発現、CD64:強く発現、中間CD123:中程度で発現、HLA-DR:中~強く発現、CD34、CD117およびその他のリンパ系抗原または骨髄系抗原:欠損)です。正常な成熟単球と比較すると、CD13およびCD14の発現減弱が認められます。
異常な細胞集団の免疫表現型は、CD34陽性の異常前駆体と未熟単球性前駆体で、単球系への分化を伴う急性骨髄性白血病と一致しています。追加検査を行ったところ、形態学的検査で芽球比率が96%、3~4%がミエロペルオキシダーゼ染色で陽性を示しました。この所見と免疫表現型データを併せると、急性単球性白血病の可能性が示唆されます。
*研究用試薬です。診断用には使用できません。
*解析ファイルの表示には、KaluzaまたはKaluza Cが必要です