臨床ビネット
70歳男性の症例。末梢血中に芽球が認められます。末梢全血サンプルで、ClearLLab 10C*パネルを使用したフローサイトメトリーによるイムノフェノタイピングを行いました。
フローサイトメトリーによるイムノフェノタイピング
B 細胞チューブ
Figure 1. この側方散乱光と前方散乱光のドットプロットは、「Singlets」ゲート内のイベントを示しています。このプロットを使って、前方散乱光が弱い細胞夾雑物(デブリ)分画を除去します。初期のアポトーシス細胞では、側方散乱光がわずかに増加しますが、後期アポトーシス細胞や壊死細胞では、側方散乱光は減少しています。「Cells」ゲート内にあるのが生細胞です。
Figure 2. このCD45と側方散乱光のドットプロットは、「Cells」ゲート内のイベントを示しています。このプロットでは、CD45陽性としてゲートされた白血球のさまざまなサブセットが区別して表示されています。通常、赤血球、血小板凝集体、組織破片、または非造血細胞などがCD45陰性となります。
Figure 3. このCD45と側方散乱光のドットプロットは、「CD45+」ゲート内のイベントを示しています。このドットプロットでは、末梢血、骨髄、リンパ節サンプルに典型的に見られる白血球である、リンパ球(Lyゲート、赤)、単球(Moゲート、緑)、顆粒球(Grゲート、青)が区別して表示されています。 CD45dimゲート(紫)で内の領域は、通常、初期の前駆体である骨髄芽球と未熟B細胞が占有しています。好塩基球、形質細胞様樹状細胞、形質細胞、NK細胞もこの領域に現れることがあります。各ゲートを構成するイベントに異なる色を適用することで、全体の解析からさまざまな集団を識別できます。前駆体(紫)の数が増加している事に注目してください。
Figure 4. このCD19と側方散乱光のドットプロットは、「Cells」ゲート内のイベントを示しています。 CD19+ゲート内は、CD19陽性細胞です。 CD19は、成熟B細胞および未熟B細胞、そして、ほとんどの形質細胞で発現しています。 CD19陽性細胞の側方散乱光の強度は、通常、低~中程度です。異常集団(紫)はCD19陽性で、側方散乱光が増加しています。
Figure 5. このCD34と側方散乱光のドットプロットはすべて、生細胞を示しています。 CD34は初期造血前駆細胞のマーカーです。 CD34は、造血幹細胞、初期骨髄前駆細胞(骨髄芽球)、未熟なB細胞とT細胞(リンパ芽球)に発現します。異常集団(紫色)はCD34を強く発現しています。
Figure 6. このCD38と側方散乱光のドットプロットはすべて、生細胞を示しています。 CD38は活性化マーカーです。血漿細胞では非常に高いレベル、未成熟骨髄およびリンパ系前駆細胞では中レベル、単球では低レベル、活性化された成熟リンパ球(赤)では様々なレベルで発現しています。異常集団(紫色)はCD38陽性です。
Figure 7. このCD20とCD10のドットプロットは、「CD45dim」ゲート内のすべての細胞を示しています。異常母集団(紫)ではCD20は発現していますが、CD10は発現していません。
Figure 8. このCD10とCD38のドットプロットは、「CD45dim」ゲート内のすべてのセルを示しています。異常集団(紫色)は、CD38陽性、CD10陰性です。
フローサイトメトリーのドットプロットをすべて表示するには、下のリンクから、PDF形式でこのケースをダウンロードしてください。
フローサイトメトリーによるイムノフェノタイピングの結果
フローサイトメトリーによるイムノフェノタイピングで、表現型の異なる細胞集団(CD13:弱、CD19:中、CD20:様々な強度、CD34:強、CD38:中、CD45:弱、CD123:低~中、HLA-DR:低、CD10、CD33、CD117、その他のB、T、 骨髄マーカー:欠損)が同定されています。正常なB細胞前駆体と比較すると、側方散乱光の増加、CD10の欠損、CD13の弱発現、CD34の増加、CD38のわずかな減少、およびCD123の発現が認められます。形態学的には95%に芽球が認められ、免疫表現型所見と併せて、Bリンパ性白血病/リンパ腫が示唆されます。
以上を総合すると、本症例の所見はBリンパ性白血病/リンパ腫と最も一致します。臨床データおよび検査データとの相関が推奨されます。その所見の裏付けとして、イムノフェノタイピングを使用してください。
*研究用試薬です。診断用には使用できません。
*解析ファイルの表示には、KaluzaまたはKaluza Cが必要です