液体粒子試験のクリーンルーム要件

注射剤または輸液製品中の汚染粒子は、微生物学的作用により、感染やアレルギー反応、極端な場合にはアナフィラキシーショックをもたらすことがあります。GMP(Good Manufacturing Practice)ガイドラインは、患者の安全確保を目的として、気中浮遊粒子による製品汚染のリスクを抑えるために、制御環境下で注射剤・輸液を製造するよう求めています。

このようなリスクは、最終製品の粒子レベルを試験するときにも存在します。USP<787>は、サンプル試験中の汚染リスクを低減し、試験段階で粒子が医薬品中に混入した場合に起こり得る「擬陽性」を防止するために、制御環境下で液体粒子試験を行うことを推奨しています。試験中にサンプルを保護することは、バッチ全体の出荷を妨げかねない費用のかかる汚染事象を回避するために極めて重要です。詳しくは、USP <787>の光遮蔽微粒子検査をご確認ください

粒子状物質の分類

全体として、半固体から固体までの物質はいずれも計数され、識別されると危険であるとみなされます。たとえば、空気、液体、ゲル、単体固体、凝集体、凝集物、薬物固体、塩、多形体、潤滑剤、可塑剤などの物質があります。

粒子状物質の一般的な種類は、外因性、内因性および固有です。

USP<787>は、タンパク質ベースの治療の内因性部分としての不溶性タンパク質粒子の存在を容認し、それらを固有の粒子として分類しています。この規格は、固有のタンパク質粒子と、存在してはならない「汚染」粒子との明確な区別を提供しています。最終製品が許容される粒子限界に適合するためには、粒子状物質の同定、由来源および特性付けを理解することが不可欠です。

USP <787>では、メーカーに対して、10ミクロン以上と25ミクロン以上の粒子を試験することを要求しています。固有のタンパク質粒子はサブミクロンまたはナノメートルサイズで検出されるため、試験によっては検出されないことがあります。しかし、タンパク質には折りたたみ(folding)や凝集を繰り返し、試験結果(pass/fail)に影響を及ぼすほどの大きさの粒子を形成してしまう傾向があります。タンパク質の凝集は、タンパク質の治療部分を閉塞させる原因となり、患者にとってはあまり効果的ではないため、望ましいものではありません。

タンパク質ベース製剤のサンプルの調製

  • 同伴ガスを排除するために材料を軽い真空に引く
    • タンパク質を扱う際に超音波処理を避ける
  • 製品を混合する際に反転することはどのような場合でも推奨されません
    • 緩やかに混合する。手で容器をゆっくりとした渦巻き状に動かす
  • 解離および/または凝集を避けるために希釈は注意深く行うこと
    • 再構成は適切な量の特定の溶媒で行う必要がある
    • 溶媒そのものが粒子の供給源にならないように、溶媒自体を試験する必要がある 注:総カウントから希釈液カウントを減算することはできない

USP<787>と光遮蔽システムの準備

光遮蔽カウンターで作業するときは、システムが正しく機能しているかどうかを確認するために、複数の試験・ソリューションを実行します。シフトやオペレータの変更、またはその他の定義された間隔でこれらのヘルスチェックを行うことを検討してください。

  • ブランク試験1(「パーティクルフリー」水)
  • 試験材料のためのシステム適合性
    • 粒子数参照標準またはUSP PCRS(特定のサイズで既知の量の物質)
    • または適切な代替法

試験とサンプル容量

USP<787>では注射剤の容量についても述べられており、通常低分子量の製剤よりも少なくなっています。USP<788>では各バッチに必要なサンプル量が25.0 mLとされていることから、タンパク質ベースの治療薬においては困難かつ高額な試験の実施が必須となっています。<787>では、一連の証拠が提供され、試験済みサンプルが製造されたバッチの適切な統計的代表である場合、メーカーは0.2 mLと5.0 mLのサンプル量で試験することができます。

総粒子含有量:6,000個に制限

粒径閾値:≥10 μmでUSP <787>/<788>同様の限界、≥25 μmで600個(すべての用量フォーマット)

USP<787>は、最終医薬製剤の安定性を特性付けるために、10 μm未満の個体群を日常的に監視することを推奨しています。

USP<787>は、タンパク質ベース治療薬のメーカーに対して、光遮蔽方式のパーティクルカウンターおよび直交法を用いて粒子試験を実施して2、時間の経過に伴う生物学的物質の構造および安定性をより解明することを奨励しています。主要な方法ではありますが、光隠蔽によってあらゆる調製物の非可視的な粒子について調べられるわけではありません。

2この主要方法を評価/検証するために直交法を用いることができます。例:2つの方法を用いて、タンパク質凝集体を調べることができます。方法1:サイズ排除クロマトグラフィー/直交方法2:超遠心分析法。