コンベンショナルとスペクトルフローサイトメーターの測定ワークフロー比較
近年、マルチカラー解析ニーズの高まりとともに注目されているスペクトルフローサイトメトリー。しかし、「コンベンショナルフローサイトメーターと何が違うのか」「新たに習得するのは大変そう」と感じている方も多いのではないでしょうか?
実は、測定の基本ワークフローはコンベンショナルとほとんど同じです。
本ページでは、コンベンショナルとスペクトルの測定ワークフローを比較しながら、違いとメリットをわかりやすく解説します。
コンベンショナルとスペクトルフローサイトメーターのワークフローの違い
| コンベンショナルフローサイトメーター | スペクトルフローサイトメーター | |
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| パネル設計 | パネル設計 | |
| 蛍光波長が近い蛍光色素が重ならないように、パネル設計を行います。使用できるチャンネルや蛍光色素には制限があるため、場合によってはパネルを複数に分けることもあります。 | 近い蛍光波長をもつ蛍光色素を同時に使用できるため、パネル設計の自由度は高いです。使用可能なチャンネルや蛍光色素が多いため、1つのパネルに集約できる場合もあります。 | |
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| 試薬・サンプル準備 | ||
| サンプル調製や抗体試薬の染色を行います。抗体試薬のタイトレーション検討は、両者とも必須です。 | ||
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| 装置準備(スタートアップ、QC) | ||
| 装置準備の工程や所要時間はほぼ同じです。 | ||
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| 補正設定(コンペンセーション) | 補正設定(アンミキシング) | |
| 陰性コントロールおよび単染色サンプルを測定し、手動もしくは自動でコンペンセーションを設定します。 | 無染色、自家蛍光、単染色サンプルを測定し、アンミキシングアルゴリズムを自動算出します。 | |
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| 測定 | ||
| 1サンプルあたりの測定時間は、両者で同じです。 | ||
コンベンショナルとスペクトルのメリット
上記に示した通り、コンベンショナルフローサイトメーターとスペクトルフローサイトメーターでは、基本のワークフローは共通しており、違いは検出の仕組みのみです。
この検出の仕組みの違いから、それぞれのメリットは以下の通りです。
| コンベンショナルフローサイトメーター | スペクトルフローサイトメーター | |
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それぞれの方式のメリットを理解した上で、研究目的や運用環境に合ったフローサイトメーターをお選びいただくことが重要です。最適なシステム選定については、ぜひお気軽にご相談ください。
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