血液からの分離

Agencourt RNAdvance BloodはSPRI(Solid Phase Reversible Immobilization:可逆固定法)常磁性ビーズベーステクノロジーに基いて、リボ核酸(RNA)分離処理を行うことができます。ライフサイエンス部門でPAXgene*チューブにより採取した血液から高品質なRNAを精製できます。このキットは1つの96ウェルプレートを約3.5時間で処理するようフォーマッティングされています。

Choose a From Blood Model

RNAdvance Blood Workflow Steps

Genomics RNAdvance Blood Workflow

機能

プロセス概要

 

  • 高品質な核酸を産出
  • qRT-PCRやマイクロアレイなど下流の遺伝子発現解析手法に適合
  • ベックマン・コールター Biomek FXP/NXP Span-8ラボ自動化ワークステーションでの自動処理に対応
  • 吸引濾過や有機抽出は不要

用途:血液からの完全長RNA抽出
下流解析法:qRT-PCRやマイクロアレイによる遺伝子発現解析

 

1. 血液に溶解緩衝液を追加し混合 2. 溶解およびプロテイナーゼKによる分解 3. 結合1緩衝液を添加
4. 浮遊物からビーズを磁気で分離し洗浄緩衝液およびエタノールで洗浄 5. DNアーゼI反応
6. 結合2緩衝液で再結合 7. 浮遊物からビーズを磁気で分離し洗浄緩衝液およびエタノールで洗浄
8. 溶出

高収率、高品質 

 

以下の研究では(図1)、Agencourt RNAdvance BloodによりPAXgene血液400 µLあたりおよそ700 ngのRNAが産出されました。これは、PAXgene保存血液1チューブの場合RNA約17 µgに相当します。Agencourt RNAdvance BloodはSPRI常磁性ビーズベースのプロセスを採用しており、安定した純度を実現しながらPAXgene Blood RNAキットよりも30%以上多くのRNAを回収できます。

 

図1.  Agencourt RNAdvance Bloodキットで抽出したPAXgene保存血液サンプル(400 µL)24本からの平均RNA回収率(µg/mL単位)およびPAXgene Blood RNAキットで抽出したPAXgene保存血液(9.4 mL)からの平均RNA回収率 Agencourt RNAdvance Bloodを用いて実施した24回の抽出の平均260/280比は1.8であり、標準偏差は0.13、%CVは7.24であった。Agencourt RNAdvance Bloodによる抽出での溶出量は20 µLであった。

Flexible and Scalable
Combining RNAdvance Blood chemistry with our Biomek Workstation offers a high throughput and minimal hand-on solution.

製品仕様

Application Uses RNA Isolation, RNA Extraction, Nucleic acid sample prep, RNA Sequencing
Format Liquid
Starting Sample Material Blood
Automated Available Yes
Item Specifications Referenced A35604

Citations

Beineke, P., Fitch, K., Tao, H., Elashoff, M. R., Rosenberg, S., Kraus, W. E., . . . PREDICT Investigators. (2012, December 3). A whole blood gene expression-based signature for smoking status. BMC Medical Genomics, 5(58). doi:10.1186/1755-8794-5-58

  • Used to extract RNA from PAXgene-collected blood samples

Allaire, N. E., Bushnell, S. E., Bienkowska, J., Brock, G., & Carulli, J. (2013, January 5). Optimization of a high-throughput whole blood expression profiling methodology and its application to assess the pharmacodynamics of interferon (IFN) beta-1a or polyethylene glycol-conjugated IFN beta-1a in healthy clinical trial subjects. BMC Research Notes, 6(8). doi:10.1186/1756-0500-6-8

  • Used to extract RNA from PAXgene-collected blood samples

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Documentation and Related Materials

Title Description
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