装置間の標準化

はじめに

フローサイトメトリー によるイムノフェノタイピングでは、検査室間で同等の結果が得られ、真の生物学的変化とアーチファクトを識別できることが重要です^1, 2。

フローサイトメトリーの標準化はパネルマーカーデザイン、サンプル処理、システムセットアップ、装置パフォーマンスのモニタリングなど多くの概念が含まれる工程であり、その複雑さは文献に広く考察されています^4, 5。 ユーザーにとって最もコントロールが難しいのは、装置のセットアップ、性能のモニタリング、コンペンセーションマトリックスの計算、各蛍光検出器に適用する電圧／ゲインの設定です。

装置を毎日モニタリングすることで、解析の再現性が保証され、別の装置から得たヒストグラム上の細胞クラスターの位置が標準化されます³。 コントロール粒子を特定のターゲットチャネルに配置するよう電圧／ゲインを設定すれば、比較的類似した装置セットアップが可能です^4, 5。または複数のパラメータがターゲットMFI（平均蛍光強度）の範囲外にある場合、システムのパフォーマンスが低下する可能性があります。再調整が必要な場合は、電圧／ゲインの変更と、パネル設定への変更の適用は手作業で行わねばなりません。これが、複数台の装置間での標準化が難しく、時間がかかる原因です。

コンパクト クリニカルフローサイトメーターDxFLEX*は、装置の精度管理と標準化の工程が自動で行えるQC/Standardization機能を実装しています。精度管理でシグナル強度と装置の精度を確認します。この機能は、MFIのモニタリングと特定のアッセイにおけるゲイン変更のトラッキングを行い、それらを直接パネル設定にリンクすることで設定変更を自動で行います。

単一または複数のDxFLEXにおける、シンプルな標準化セットアップのワークフロー

一貫性の向上および装置間のばらつき低減のため、DxFLEXはシンプルで信頼性の高い標準化ワークフローを提供し、複数の装置間でサンプル結果の一貫性を確保しています。

DxFLEXでは、DxFLEX用ソフトウエアCytExpertに標準化機能を内蔵しており、ユーザー定義のターゲット値に基づいたゲイン設定の自動キャリブレーションを毎日実行し、同じアプリケーションに使用されている別のDxFLEXに同じターゲット値を適用することが可能です。

ゲインの最適化後にFlow-Set Pro Fluorospheres**で取得したDxFLEXターゲット。データは例示のために表示しています。

参考文献

1. Lacombe, F. et al. Harmonemia: a universal strategy for flow cytometry immunophenotyping-A European LeukemiaNet WP10 study. Leukemia 30, 1769–1772 (2016).
2. Kalina, T. et al. EuroFlow standardization of flow cytometer instrument settings and immunophenotyping protocols . Leukemia 26, 1986–2010 (2012).
3. Schwartz, A., Marti, G. E., Poon, R., Gratama, J. W. & Fernández-Repollet, E. Standardizing flow cytometry: A classification system of fluorescence standards used for flow cytometry. Cytometry (1998). doi:10.1002/(SICI)1097-0320(19981001)33:2<106::AID-CYTO4>3.0.CO;2-H
4. Maecker, H. T., McCoy, J. P. & Nussenblatt, R. Standardizing immunophenotyping for the Human Immunology Project. Nat. Rev. 12, 191–200 (2012).
5. Perfetto, S. P., Ambrozak, D., Nguyen, R., Chattopadhyay, P. & Roederer, M. Quality assurance for polychromatic flow cytometry . Nat. Protoc. 1, 1522–1530 (2006).

DxFLEX is an IVD instrument that is available only in countries where the regulatory approval is obtained from the local regulatory agencies. Please check with your local sales representatives before placing your orders.

Flow-Set Pro Fluorospheres: For In Vitro Diagnostic Use. Rx Only in the U.S.A.

Flow-Set Pro Fluorospheres have not been validated as part of the DxFLEX system and are only meant to serve as an example to demonstrate the general standardization process. DxFLEX Daily QC Fluorospheres or any other reference material that is relevant for your applications may be used as the standardization samples.