Ⅰ. 各種溶血手順フローチャート (ヒト全血)2
2. Wash
2. Wash(1)
注1)いずれの抗体のタイプでも使用できます
注2)イムノプレップ及びOptiLyseB、 Cによる溶血では、いずれも細胞の固定が行われます。
注3)VersaLyse 溶血試薬による溶血で溶血固定を同時に行う場合は、別途 IOTest 3 固定試薬を
ご用意ください。
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OptiLyse B
(Wash) |
OptiLyse C
(Wash) |
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|---|---|---|---|---|
| 抗体の反応 | 抗体規定量 + ヒト全血100μL |
抗体規定量 + ヒト全血100μL |
抗体規定量 + ヒト全血100μL |
抗体規定量 + ヒト全血100μL |
| 室温15~30分 | 室温15~30分 | 室温15~30分 | 室温15~30分 | |
| 洗浄 | PBS 2~3mL添加 400×g、5分 |
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| 溶血 | TQ-Prepにて 溶血、固定処理 |
1mL(原液を25倍希釈) | 溶血剤 100μL | 溶血剤 500μL |
| 30秒~2分室温放置 | 10分室温放置 | 10分室温放置 | ||
| 反応停止 | フィクサティブ250μL | 蒸留水 1mL (10分放置) |
PBS 500μL (15分放置) |
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| PBSで洗浄 | PBS 2mL | |||
| 400~450×g、5分 | ||||
| PBSで洗浄 | PBS 2mL | PBS 2mL | PBS 2mL | PBS 2mL |
| 400~450×g、5分 | 400~450×g、5分 | 400~450×g、5分 | 400~450×g、5分 | |
| 再浮遊 | PBS 500μL | PBS 500μL | PBS 500μL | PBS 500μL |
| 測定 | 2~8℃で保存 (24時間以内)* |
2~8℃で保存 (24時間以内)* |
2~8℃で保存 (24時間以内)* |
2~8℃で保存 (24時間以内)* |
| (保存時間) |
*10倍希釈 IOtest 3 固定試薬または0.5%パラホルムアルデヒド溶液に再浮遊した場合。
IOTest 3 固定試薬(製造番号A07800)は8%ホルムアルデヒド溶液です。使用時に10~20倍希釈してご使用ください。
2. Wash(2)
注1)いずれの抗体のタイプでも使用できます
注2)イムノプレップ及びOptiLyseによる溶血では、いずれも細胞の固定が行われます。
注3)VersaLyse 溶血試薬による溶血で溶血固定を同時に行う場合は、別途IOTest 3 固定試薬を
ご用意ください。
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固定なし
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固定あり
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固定なし
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固定あり
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|---|---|---|---|---|
| 抗体の反応 | 抗体規定量 + ヒト全血100μL |
抗体規定量 + ヒト全血100μL |
抗体規定量 + ヒト全血100μL |
抗体規定量 + ヒト全血100μL |
| 室温15~30分 | 室温15~30分 | 室温15~30分 | 室温15~30分 | |
| 溶血 | 溶血剤1mL | 溶血固定液注3)1mL (VersaLyse:IOTest 3 固定試薬 =1mL:25μL) |
溶血剤 2mL | 溶血剤 2mL |
| 10分室温放置 | 10分室温放置 | 10分室温放置 | 10分室温放置 | |
| PBSで洗浄 | PBS 2mL | PBS 2mL | PBS 2mL | PBS 2mL |
| 400~450×g、5分 | 400~450×g、5分 | 400~450×g、5分 | 400~450×g、5分 | |
| 10倍希釈IOTest 3 固定 試薬500μL または 0.5%パラホルムアルデ ヒド加 PBS 500μL |
10倍希釈IOTest 3 固定 試薬500μL または 0.5%パラホルムアルデ ヒド加 PBS 500μL |
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| 再浮遊 | PBS 500μL | PBS 500μL | ||
| 測定 | 2~8℃で保存 (1時間以内) |
2~8℃で保存 (24時間以内)* |
2~8℃で保存 (1時間以内) |
2~8℃で保存 (24時間以内)* |
| (保存時間) | ||||
*10倍希釈 IOtest 3 固定試薬または0.5%パラホルムアルデヒド溶液に再浮遊した場合。
IOTest 3 固定試薬(製造番号A07800)は8%ホルムアルデヒド溶液です。使用時に10~20倍希釈してご使用ください。