フローサイトメトリーによる簡単な17 マーカー、 18カラーのヒト血液フェノタイピング
Authors: James McCracken, Ph.D., Jonel Lawson
はじめに
フローサイトメトリーの能力は、レーザーやより多くの検出器、より優れたシグナル処理が追加されるなど、進化をつづけており、ハイパラメータ アプリケーションは、特別な研究だけのものから一般的なものへと変わりつつあります。ただし、高品質のデータを得るために、パネルを構成する抗体と蛍光色素の組み合わせを何度も繰り返し、信頼性の高い結果を得るために徹底的なテストが必要となることから、こうしたハイパラメータ アプリケーションを確立するプロセスは、ユーザーにとって決して簡単なことではありません。しかし、フローサイトメトリーのシグナル検出の革新によって、パネルデザインとデータ生成のプロセスは容易になりました。
シグナル検出にAvalanche Photodiode detectors(APD)を用いたことで、CytoFLEXはパネルデザインを容易にする2つの重要な利点を備えています。まず、APDはPhotomultiplier tubes(PMT)に比べて、より広いスペクトル範囲にわたってより高い感度を示します。次に、この高い光感度によって測定誤差が小さくなり、その結果、漏れ込みが最小限に抑えられます1。ハイパラメータ実験では、spillover spreading( 漏れ込みの補正によるネガティブピークの広がり)を最小限に抑えることで、暗い集団と陰性の集団をより確実に識別できるため、暗いマーカーに対するチャンネル選択はそれほど重要ではなくなります。さらには、DURACloneなどのドライ抗体試薬パネルを使用することによっても、デザインを容易にすることができます。DURAClone IMパネルを「バックボーン」として用いることで、多くのパラメータを事前に最適化し安定した状態に保ったまま、追加の染色を随時行うことが可能です。
CytoFLEXとDURACloneの革新的テクノロジーを組み合わせることにより、ハイパラメータ実験系を作成する際のデザインやセットアップに要する労力を減らすことができます。このノートでは、 とDURAClone IM T Cell Subset パネルを用いて、簡単にパネルをデザインし、信頼性の高いデータを作成する方法を示します。また、CytoFLEX LXには多数の検出チャンネルがあるため、ひとつのDURAClone IM バックボーンを複数の実験デザインやニーズに合わせて変更することで、実験中に生じた新たな疑問に素早く答えることができます。ここでは、これらの技術を用いて18カラーパネルを迅速にデザインし、テストを行う方法を説明します。
図1. PMTベースのシステムとAPDベースのシステムの比較
パネル A. スペクトル範囲におけるAPDとPMTの量子効率(Quantum Efficiency:QE)、すなわち光子から電子への変換効率を示したグラフ。
このように光子から電子への変換効率が高くなることで、測定誤差が小さくなり、感度と分解能が向上します。
“A Comparison of Avalanche Photodiode and Photomultiplier Tube Detectors for Flow Cytometry” by Paul Wallace et al, 2008, Proceedings of SPI, Vol 6859. 2
パネル B. PMT(左図)とAPD(右図)のSpherotech 8ピークビーズの比較から、
特に650 nmを超える蛍光波長でQEが高くなるため、非常に暗いビーズでも分解能が高いことを示しています。
パネル C. APDベースのシステム(右図)では、PMTベースのシステム(左図)に比べてQEが高いために、
隣接する検出器へのデータの広がりも小さくなります。
パネル D. DURACloneを使用した場合と使用しない場合の抗体パネルデザインワークフローの比較。
DURACloneパネルは、事前に最適化され安定した試薬のため、より少ない労力で大きなパネルを構築することができます。
DURACloneはそれだけ使用するか、テストしてより多くの色を追加して使用することができます。
材料および方法
製品 |
製造業者 |
製品番号 |
CytoFLEX Daily QC Fluorospheres |
Beckman Coulter Life Sciences |
|
CytoFLEX Sheath Fluid |
Beckman Coulter Life Sciences |
|
CytoFLEX Daily IR QC Fluorospheres |
Beckman Coulter Life Sciences |
|
VersaComp Antibody Capture Beads |
Beckman Coulter Life Sciences |
|
VersaLyse Lysing Solution |
Beckman Coulter Life Sciences |
|
Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline |
CORNING cellgro |
21-031-CV |
Brilliant Stain Buffer |
BD Biosciences |
566349 |
DURAClone IM T Cell Subsets |
Beckman Coulter Life Sciences |
|
CD20 BUV395 |
BD Biosciences |
563781 |
HLA-DR BUV661 |
BD Biosciences |
565074 |
CD19 BUV737 |
BD Biosciences |
564304 |
CCR4 BV605 |
BioLegend |
359417 |
CD95 BV650 |
BioLegend |
305641 |
CD25 BV785 |
BioLegend |
302637 |
CD33 PC5 |
Beckman Coulter Life Sciences |
|
iFluor860 (IR fixable viability dye) |
AAT Bioquest |
1408 |
Whole EDTA blood (24-HR post venipuncture) |
N/A |
N/A |
740/35 Band Pass Filter |
Beckman Coulter Life Sciences |
|
CytoFLEX LX UV |
Beckman Coulter Life Sciences |
ヒント
- 複数のBrilliant Violet 色素またはBrilliant Ultraviolet 色素を使用する場合は、アーティファクトをもたらす可能性がある色素の相互作用を防ぐため、色素を添加する前にBrilliant Stain Buff erwをDURACloneチューブに添加してください。
- 試薬が十分に混合されるよう、検体および追加の蛍光標識抗体を添加後、ただちにDURACloneチューブを攪拌(ボルテックス)してください。
結果
図5. 17 マーカー、18カラーのパネルデザイン。
この試験で用いたマーカーと蛍光色素の組み合わせを示しており、
10カラーのDURAClone IM T Cell Subset のバックボーンは赤枠で、使用しなかったチャンネルはグレーの網掛けで示しています。
図 6a. 高純度のゲーティング
CD4陽性T細胞
図 6b. CD4 T 細胞サブセット解析
CD8陽性T細胞
図 6c. CD8 T 細胞サブセット解析
B細胞
図 6d. B細胞サブセット解析
図 7. コンペンセーションマトリックスおよび階層的ゲーティング
この実験では、計3名の健常ドナーから得た静脈穿刺24時間後の検体を試験しました。まず、バックボーンとして10カラーのDURAClone IM T Cell Subsetを用い、パネルを完成させるために7つのマーカーと生細胞識別色素を追加しました。マーカーと蛍光色素の組み合わせは、マルチカラーデザインの標準原則に従い、目的のマーカーに対する蛍光標識抗体の入手可能性も考慮して選択しました。
詳細なT細胞解析を開始する前に、予備的なゲーティングを行います。IR 励起の固定可能な生細胞識別色素を用いて死細胞を除外し、生細胞をゲーティングします。次に、SSC対CD45プロットとして生細胞をプロットし、これを白血球(WBC)の特定のために用います。デブリを除外するため、WBCの周囲にゲートを作成します。リンパ球ゲートは、SSCが低くCD45が高い蛍光プロファイルを持つ集団の周囲に作成します。リンパ球は、ダブレット(凝集細胞)をゲートアウトし、解析から単球(CD33陽性)を除外することで、さらに絞り込めます。最後に、実験中のシステムの流路系および安定性の内部検証として、Timeプロットを追加しています(図6a)。
ここでは、T細胞サブセットで計25個の集団が評価されています(図6b、6c)。この解析を始めるにあたり、まずリンパ球リージョン内にCD3陽性細胞のリージョンを描画します。これにより、NK細胞(CD8)や単球(CD4)などのマーカーを発現する可能性があるほかの細胞種類から、CD4陽性T細胞とCD8陽性T細胞を区別することができます。
CD4陽性T細胞サブセットを詳しく見てみると、CD4陽性CD25陽性T細胞の集団は制御性T細胞を構成しています。このマーカーは非常に暗いことが多くデータの広がりの可能性が高いマルチカラーパネルで確実にゲーティングを行うことは難しいことから、信頼性を高めるためにFluorescence minus One(FMO)のコントロールを組み込んでいます。CD4陽性細胞のゲーティングでは、Tregの関数としてCCR4の発現を評価することも可能です。CCR4マーカーは皮膚細胞のホーミングにおいて重要な役割を担っており、CCR4陽性細胞のサブセットはエフェクター制御性T細胞の抑制をコントロールしているといわれています3。
CD45RAとCCR7を組み合わせることで、ナイーブ(CD45RA陽性CCR7陽性)、セントラル(CD45RA陰性CCR7陽性)、メモリー、エフェクター(CD45RA陽性CCR7陰性)、エフェクターメモリー(CD45RA陰性CCR7陰性)細胞など、活性化中に起こるT細胞サブセットの様々な段階や経路を調べることができます。各表現型は、CD27とCD28の共刺激分子の様々な発現を調べることで、さらに評価することが可能です。
Program Death Cell-1(PD-1)は、CD28スーパーファミリーに属し、制御性T細胞を活性化しますが、エフェクターT細胞の機能は妨げます。また、CD95は細胞を介したアポトーシスに関与します。CD95は主にメモリーT細胞に発現していますが、ナイーブ表現型の少数のT細胞にもCD95が発現しており、これらはいわゆるメモリータイプの幹細胞様T細胞であると考えられます(図6b)4。
CD8 T 細胞サブセットに関しても、CD4と同様の手法でCD45RA、CCR7、CD28およびCD27マーカーサブセットを調べています。CD8陽性CD57陽性サブセットは、細胞傷害性が高く、増殖能が低い最終分化T細胞を表しています。このT細胞サブセットにおいても、CD45RAの機能としてCD95の発現が再度評価されています(図6c)。
このパネルでは、T細胞ほど十分に抗体染色されていませんが、CD3陰性集団にB細胞(CD19 陽性、CD20陽性、HLA-DR陽性)がゲーティングされていることが観察できます。この集団またはほかの細胞種類において詳細な情報を得たい場合は、バックボーンパネルのオープンチャンネルを用いて容易に変更することが可能です(図6d)。
結論
このアプリケーションノートでは、DURACloneのドライ抗体試薬アッセイをイムノフェノタイピングパネルのバックボーンとして用いることで、より詳細な解析を簡単に実施できることを示しました。まずバックボーンを用い、次にサイトメーターのオープンチャンネルを利用することにより、結果を迅速に得ることができ、また、パネルの複数のパラメータが事前に最適化されていることが分かっているという安心感を得ることができます。また、この方法は、研究における特定の質問に答えるためにdrop-in試薬を設定できるため、ラボの柔軟性も高くなります。
さらに、DURAClone IMチューブを使用することで、試薬の分注に要する時間が削減でき、複数の試薬を複数のサンプルチューブに分注する際に起きる過誤の可能性も低くなります。
さらには、CytoFLEXのAPD検出器の感度により、柔軟なハイパラメータ パネルデザインが可能となります。発現の弱いマーカーであっても、例えば、CD25 BV786をV763チャンネルにセットするように、そのマーカーを高感度のチャンネルに特別にセットする必要はもはやありません。FMOは行われていますが、CD4陽性CD25陰性細胞とCD4陽性CD25陽性細胞との区別ははっきりと確認できたことから、このシステムが暗い集団と陰性の集団を識別できることは明らかです。
プロトコル
- DURACloneコンペンセーションコントロール(DURACloneキットに含む)を染色します。
a. 各コンペンセーションコントロールチューブをラックにセットします。
b. 陽性および陰性VersaCompビーズ各1 滴を各チューブに添加します。
c. 室温で20分間、遮光して放置します。
d. PBS+ 1% BSAバッファー1 mLを各チューブに添加し、300×gで6分間遠心分離します。
e. 上清を除きます。
f. 攪拌(ボルテックス)を行います。
g. PBS+ 1% BSAバッファー400 μLに再懸濁します。 - drop-in試薬のコンペンセーションコントロールを作成します。
a. 陽性および陰性VersaCompビーズ各1 滴を各チューブに添加します。
b. 室温で20分間、遮光して放置します。
c. PBS+ 1% BSAバッファー1 mLを各チューブに添加し、300×gで6分間遠心分離します。
d. 上清を除きます。
e. 攪拌(ボルテックス)を行います。
f. PBS+ 1% BSAバッファー400 μLに再懸濁します。 - 染色血液を調製します。
a. Brilliant Staining Buff er 50 μLを各DURACloneチューブに添加します。
b. drop-in抗体およびiFluor 860のそれぞれの試験量を各DURACloneチューブに添加します。
c. 別の12×75 mmチューブを未染色全血とします。
d. 各混合抗体試薬チューブおよび未染色の全血チューブに新鮮な全血100 μLを添加します。
4 | Every event matters
e. 6 ~ 8 秒間攪拌(ボルテックス)を行います。
f. チューブを遮光して15分間放置します。
g. 2 mLのVersaLvseを添加します。
h. 1 ~ 3秒攪拌(ボルテックス)します。
i. 各チューブを室温で、遮光して放置します。
j. 各チューブを200×gで5分間遠心分離します。
k. 上清を除きます。
l. 細胞ペレットを軽くたたいて残留している上清に懸濁します。
m. 各混合抗体試薬チューブにIR Fixable dyeを5 μL添加します。
n. 室温で20分間、遮光して放置します。
o. PBS+ 1% BSAバッファー3 mLに細胞ペレットを再懸濁し、洗浄します。
p. 上清を除きます。
q. 細胞ペレットを静かにタップし、細胞ペレットをPBS+ 1% BSA 500 μLに再懸濁します。
測定
4. スタートアップ
a. CytoFLEXシステムスタートアッププログラムを実行します。
b. CytoFLEXシステムスタートアッププログラムを実行します。
図2. UVレーザーを備えたCytoFLEX LXの検出器構成
c. ユーザーマニュアル「CytoFLEXシリーズ取扱説明書」(文書番号:B54849AJ)に従って、精度管理手順を実施します。
5. コンペンセーション実験を作成します。
a. ロット変更時にコンペンセーションコントロールを更新できるようにするため、使用するDURACloneコントロールとdrop-in試薬のロット番号を入力します。
b. サンプルタイプの列でビーズを選択し、シングルカラーコントロールを反映させます。
図3. チャンネルとサンプルタイプを選択できるコンペンセーションセットアップウィンドウ
c. VersaCompビーズは各チューブ内に陰性ピークが含まれているため、ユニバーサルネガティブ使用のチェックは外します。
図 4. シングルカラー測定とゲーティングの例
d. 各コンペンセーションサンプルを記録します。
i. シングレットビーズが含まれるようにスキャッターゲートを移動させます。
ii. 対数線形スライダーを用いて陰性集団の域を狭め、陰性集団が含まれるようにゲートを移動させます。
iii. 陽性集団が含まれるようにゲートを移動させます。
e. コンペンセーションマトリックスを計算し、ライブラリに保存します。
6. CytExpertでExperimentを作成します。
a. 作成したコンペンセーションライブラリをインポートし、現在のゲインに基づいてマトリックスを変換します。
b. プロットを作成します。
c. 記録します。
References
1. Nguyen R, Perfetto S, Mahnke YD, et al. Quantifying spillover spreading for comparing instrument performance and aiding in multicolor panel design. Cytometry A 2013 Mar; 83 (3): 306-315. Available from URL: 2013 Feb 6; doi: 10.1002/cyto.a.22251.
2. Lawrence W, Varadi G, Entine G, et al. A Comparison of Avalanche Photodiode and Photomultiplier Tube Detectors for Flow Cytometry. Proceedings of SPIE 2008 Feb; Vol 6859. Available from URL: 2008 Feb; doi: 10.1117/12.758958.
3. Baatar D, Olkhanud P, Sumitomo K, et al. Human Peripheral Blood T Regulatory Cells (Tregs), Functionally Primed CCR4+ Tregs and Unprimed CCR4− Tregs, Regulate Effector T Cells Using FasL. J Immunol 2007 Apr 15; 178(8): 4891–4900.
4. Gattinoni L, Lugli E, Ji Y, et al. A human memory T-cell subset with stem cell-like properties. Nat Med 2011 Sep 18; 17(10): 1290–1297. Available from URL: doi:10.1038/nm.2446.
5. Van de Veen W, Stanic B, Yaman G, et al. IgG4 production is confined to human IL-10–producing regulatory B cells that suppress antigen-specific immune responses. J ALLERGY CLIN IMMUNOL 2013 APR; 131 (4).
6. Mauri C, Menon, M. The expanding family of regulatory B cells. International Immunology 2015 JUN; 27 (10): 479-486.
FLOW-4385APP11.18
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- A High-Throughput, Automated Screening Platform for IgG Quantification During Drug Discovery and Development
- Adaptive Laboratory Evolution of Pseudomonas putida in the RoboLector
- Aerobic cultivation of high-oxygen-demanding microorganisms in the BioLector XT microbioreactor
- BioLector マイクロバイオリアクターを使ったプロバイオティクス細菌の嫌気培養プロセス
- Assay Assembly for Miniaturized Quantitative PCR in a 384-well Format Using the Echo Liquid Handler
- Automated Research Flow Cytometry Workflow Using DURA Innovations Dry Reagent Technology with the *Biomek i7 Automated Workstation and *CytoFLEX LX Flow Cytometer
- Automating antibody titration using a CytoFLEX LX analyzer Integrated with a Biomek i7 Multichannel workstation and Cytobank streamlined data analysis
- Automated IDT Alt-R CRISPR/Cas9 Ribonucleoprotein Lipofection Using the Biomek i7 Hybrid Automated Workstation
- Automation of protein A ELISA Assays using Biomek i7 hybrid workstation
- Monitoring E. coli Cultures with the BioLector and Multisizer 4e Instruments
- Monitoring Yeast Cultures with the BioLector and Multisizer 4e instruments
- Biomek i7 Hybrid Automated KAPA mRNA HyperPrep Workflow
- Biomek i-Series Automated Promega Wizard MagneSil Tfx™ Plasmid Purification System
- Cultivation of suspended plant cells in the BioLector®
- チャネル数の異なるFCSファイルをRで書き換える方法
- Determination of cell death in the BioLector Microbioreactor
- DO-controlled fed-batch cultivation in the RoboLector®
- Screening of yeast-based nutrients for E. coli-based recombinant protein production using the RoboLector Platform
- E. coli fed-batch cultivation using the BioLector® Pro
- Echo System-Enhanced SMART-Seq v4 for RNA Sequencing
- Filling MicroClime Environmental Lids
- Fully Automated Peptide Desalting for Liquid Chromatography–Tandem Mass Spectrometry Analysis Using Beckman Coulter Biomek i7 Hybrid Workstation
- Getting Started with Kaluza: Data Scaling and Compensation Adjustment
- 環境モニタリングに最適なハンドヘルドパーティクルカウンターを選ぶためのシンプルガイド
- High throughput cultivation of the cellulolytic fungus Trichoderma reesei in the BioLector®
- High-throughput IgG quantitation platform for clone screening during drug discovery and development
- High-throughput Miniaturization of Cytochrome P450 Time-dependent Inhibition Screening Using the Echo 525 Liquid Handler
- Host Cell Residual DNA Testing in Reduced Volume qPCR Reactions Using Acoustic Liquid Handling
- Improved data quality of plate-based IgG quantification using Spark®’s enhanced optics
- Valita Titer 384ウェルプレートによるIgG定量スループットの向上
- Linearity of the Vi-CELL BLU Cell Counter and Analyzer
- Media optimization in the RoboLector platform for enhanced protein production using C. glutamicum
- MET ONE 3400+ LDAP & Active Directory connection Guide
- フローサイトメーターCytoFLEX Sでデザインしたパネルの セルソーターCytoFLEX SRTへの移行方法
- Miniaturization of an Epigenetic AlphaLISA Assay with the Echo Liquid Handler and the BMG LABTECH PHERAstar FS
- Miniaturization of Cytochrome P450 Time-dependent Inhibition Screening Using the Echo 555 Liquid Handler
- Miniaturized 16S rRNA Amplicon Sequencing with the Echo 525 Liquid Handler for Metagenomic and Microbiome Studies
- Miniaturized Enzo Life Sciences HDAC1 Fluor de Lys Assays Using an Echo Liquid Handler Integrated in an Access Laboratory Workstation
- Miniaturized EPIgeneous HTRF Assays Using the Echo Liquid Handler
- Miniaturized Gene Expression in as Little as 250 nL
- Miniaturized Genotyping Reactions Using the Echo Liquid Handler
- CytoFLEX SRTセルソーターによる ミックスモードソーティング
- Mode of operation of optical sensors for dissolved oxygen and pH value
- Nanoliter Scale High-Throughput Protein Crystallography Screening with the Echo Liquid Handler
- Nanoscale Sorting with the CytoFLEX SRT Cell Sorter
- Low-pH profiling in µL-scale to optimize protein production in H. polymorpha using the BioLector
- Optimized NGS Library Preparation with Acoustic Liquid Handling
- BioLector XT マイクロバイオリアクターを使った Chlorella vulgaris の光照射培養
- Plate Deposition Speed Comparison of Astrios and CytoFLEX SRT Cell Sorters
- Preparation of Mouse Plasma Microsamples for LC-MS/MS Analysis Using the Echo Liquid Handler
- Protocols for use of SuperNova v428 conjugated antibodies in a variety of flow cytometry applications
- VTi 90ロータと塩化セシウム等密度勾配超遠心法(CsCl DGUC)を用いたウイルスベクター精製
- Rapid Measurement of IgG Using Fluorescence Polarization
- Valita Titer アッセイを用いた迅速なウサギIgG定量
- Robust and High-Throughput SARS-CoV-2 Viral RNA Detection, Research, and Sequencing Using RNAdvance Viral and the OT-2 Platform
- Screening yeast extract to improve biomass production in acetic acid bacteria starter culture
- 卓上型セルソーターCytoFLEX SRTによるシングルセルソーティング
- 卓上型セルソーターCytoFLEX SRTを使用した 稀少なE-SLAM造血幹細胞のソーティングと その後の培養
- SWOFF The unrecognized yet indispensable sibling of FMO
- The scattered light signal: Calibration of biomass
- Utilization of the MicroClime Environmental Lid to Reduce Edge Effects in a Cell-based Proliferation Assay
- Vertical Rotor Case Study with Adenovirus
- Variability Analysis of the Vi-CELL BLU Cell Viability Analyzer against 3 Automated Cell Counting Devices and the Manual Method
- 超遠心分離法によるウイルスベクターの精製
- Whole Genome Sequencing of Microbial Communities for Scaling Microbiome and Metagenomic Studies Using the Echo 525 Liquid Handler and CosmosID
- Comparative Analysis of Cell-Free DNA Extraction Efficiency from Plasma
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製品カタログ / データシート
- Access Single Robot System for Synthetic Biology Workflows
- Automated Solutions for Cell Line Development
- Automated Solutions for ELISA
- Echo Acoustic Liquid Handling for Synthetic Biology
- HIAC 8011+ Liquid Particle Counting Systems
- HIAC 9703+ による不溶性微粒子試験
- LS 13 320 XR - Laser Diffraction Particle Size Analyzer
- Download the Valita Titer Assay Brochure
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導入事例 (インタビュー記事)
- 高速冷却遠心機を用いたアデノウイルスベクターの効率的で再現性の良い調製方法
- セルソーターを用いたバイオ燃料高産生藻のハイスループット遺伝子改変オートメーションシステム
- 老舗の培地メーカーが挑む抗体開発と培地開発
- 「細胞のごみ」を分解するオートファジーの 全容に迫る
- B細胞の生成と成熟、維持の研究を創薬にも活かす
- 生殖生物学の基礎研究と現在の生殖補助医療
- 動脈硬化の免疫的な機序から心血管疾患の治療と予後を研究 ― マルチカラーフローサイトメーターで研究を加速 ―
- 10カラーフローサイトメトリーを用いた細胞マーカー解析の有用性
- 研究に最適な卓上遠心機を選択するポイント
- 新しいアプローチでの膠原病疾患治療に向けて
- 最善の総合医療を提供し、疾病の克服と健康の増進を通じて社会に貢献する
- 機能性抗体で免疫応答を制御し、新しい治療戦略と創薬に結びつける ― 研究を加速するフローサイトメーター ―
- 炎症の観点から疾患の発症メカニズムを解明し、治療薬を創出する
- がん遺伝子パネル解析/クリニカルシーケンスにおけるFFPE組織切片からのゲノムDNA抽出の重要性
- 大学における留学生を対象とした英語による遠心機の安全教育セミナーの有用性
- 大学における共通機器室の機器管理とサポート体制について
- 超遠心法を用いたエクソソームの分離精製
- Fast, Cost-Effective and High-Throughput Solutions for DNA Assembly
- 免疫研究で漁業の未来を変える - 研究の効率を上げるフローサイトメーター -
- 高精度の迅速診断に向けて - Navios EXによる造血器腫瘍細胞の10カラー解析の導入 -
- High-throughput next-generation DNA sequencing of SARS-CoV-2 enabled by the Echo 525 Liquid Handler
- フローサイトメトリーによる造血器腫瘍解析検査の病院内実施がもたらすもの
- iPS 細胞のメカニズムと 安全で効率のよい 樹立・維持法を追究
- Leveraging acoustic and tip-based liquid handling to increase throughput of SARS-CoV-2 genome sequencing
- X線結晶構造解析のための膜タンパク質精製の基礎
- 密度勾配超遠心法による簡便な細胞小器官の分画
- 粒子間の相互作用研究から、細胞と粒子の相互作用研究へ
- 遺伝子治療ベクターの品質評価における最新事情
- 虹彩細胞からの網膜細胞再生へ ~MoFlo Astriosの役割~
- 堆積地質学の研究における粒度分布測定
- iPS 細胞由来の “ 肝臓の芽 ” の移植で重度肝疾患の治療を目指す
- Tierra Biosciences reveals major molecular discovery
- 患者の自己骨髄細胞を用いて肝硬変を治療する
- 大学の共通機器室での機器管理とサポート体制について
- University of Texas Medical Branch UTMB Workflow Comparison Study with the AQUIOS CL Flow Cytometer
- 超遠心法によるウイルス精製の基礎
- 総合カタログ
- eBook
- フライヤー
-
インタビュー記事
- フローサイトメーターを導入した経緯や導入後の現状について -順天堂大学医学部附属静岡病院-
- 水田土壌細菌の菌体計測における コールターカウンターの有用性
- 小児白血病治療における中央診断 -小児白血病グループ研究統合の中での変遷-
- 小児白血病治療における中央診断 -小児白血病中央診断の現状-
- がん微小環境の1細胞解析におけるクラウドベース解析ソフトウエア Cytobankの貢献
- iGEM 2021 Kyotoチーム : FLOWEREVER 学部生による合成生物学の社会実装に向けた技術開発
- 院内検査室におけるフローサイトメトリー検査 -国家公務員共済組合連合会 虎の門病院-
- Fundamentals of Ultracentrifugal Virus Purification
- がん抑制遺伝子p53の標的遺伝子PHLDA3の機能解析進展とAMPure XPによるDNAクリーンアッププロセスへの貢献
- がん抑制遺伝子p53の標的遺伝子PHLDA3の機能解析進展と AMPure XPによるDNAクリーンアッププロセスへの貢献
- 籔井教授の講義シリーズ:超遠心機に振り回された研究を回顧して
-
ポスター
- AMP 2019: Correlation Between Mutations Found in FFPE Tumor Tissue and Paired cfDNA Samples
- Applications of Ultracentrifugation in Purification and Characterization of Biomolecules
- Automating Genomic DNA Extraction from Whole Blood and Serum with GenFind V3 on the Biomek i7 Hybrid Genomic Workstation
- ABRF 2019: Automated Genomic DNA Extraction from Large Volume Whole Blood
- Automated library preparation for the MCI Advantage Cancer Panel at Miami Cancer Institute utilizing the Beckman Coulter Biomek i5 Span-8 NGS Workstation
- Automating Cell Line Development for Biologics
- Cellular Challenges: Taking an Aim at Cancer
- Cell-Line Engineering
- Characterizing the Light-Scatter Sensitivity of the CytoFLEX Flow Cytometer
- ASHG 2019: Comparison between Mutation Profiles of Paired Whole Blood and cfDNA Samples
- ASHG 2019: Correlation Between Mutations Found in FFPE Tumor Tissue and Paired cfDNA Samples
- AACR 2019: Isolation and Separation of DNA and RNA from a Single Tissue or Cell Culture Sample
- 細胞数をカウントする方法
- AACR 2019: Correlation between Mutations Found in FFPE Tumor Tissue and Paired cfDNA Samples
- Preparing a CytoFLEX for Nanoscale Flow Cytometry
- A Prototype CytoFLEX for High-Sensitivity, Multiparametric Nanoparticle Analysis
- AGBT 2019: A Scalable and Automatable Method for the Extraction of cfDNA
- ABRF 2019: Simultaneous DNA and RNA Extraction from Formalin-Fixed Paraffin Embedded (FFPE) Tissue
- A Complete Automation and Reagent Workflow for Analysis of cfDNA: from Plasma to Variants
- Quantification of AAV Capsid Loading Fractions: A Comparative Study
- SARS-CoV2感染応答についての標準化ドライ抗体パネルを使用したフローサイトメトリーの有用性
- 製品の取扱説明書
- プロトコル
-
ホワイトペーパー
- Centrifugation is a complete workflow solution for protein purification and protein aggregation quantification
- AUC Insights - Analysis of Protein-Protein-Interactions by Analytical Ultracentrifugation
- GMPクリーンルームの清浄度クラスと日常環境モニタリング
- AUC Insights - Assessing the quality of adeno-associated virus gene therapy vectors by sedimentation velocity analysis
- AUC Insights - Sample concentration in the Analytical Ultracentrifuge AUC and the relevance of AUC data for the mass of complexes, aggregation content and association constants
- フローサイトメトリーによる生物学的機構の解析
- USPSubvisible Particulate Matterの変更
- Changes to USP Total Organic Carbon
- AccuPlex™SARS-CoV-2標準物質キットを用いたRNAdvance Viral XP RNA抽出キットの特徴付け
- CytoFLEX Platform Flow Cytometers with IR Laser Configurations: Considerations for Red Emitting Dyes
- Evaluation of the Analytical Performance of the AQUIOS CL Flow Cytometer in a Multi-Center Study
- Hydraulic Particle Counter Sample Preparation
- ベックマン・コールター社製ウイルスRNA抽出溶解緩衝液を用いたCOVID-19疾患ウイルスSARS-CoV-2の不活化
- Liquid Biopsy Cancer Biomarkers – Current Status, Future Directions
- MET ONE 3400+ IT Implementation Guide
- Reproducibility in Flow Cytometry
- 大容量遠心の効率化
- SuperNova v428:新しいフローサイトメトリー用の高輝度蛍光色素
- ライフサイエンス分野製品 安全性データシート(SDS/MSDS)
-
アプリケーションノート