DURAClone RE CTC/PerFix CTC

 

DURACloneシリーズは、プレミックスされた抗体が乾燥状態でチューブ底部にコーティングされているため、チューブに検体を添加するだけで抗体反応を開始できます。 従来の液状抗体では必須である抗体分注作業が不要となるため、サンプル調製のワークフローを大きく簡略化できます。

 

DURAClone RE CTCとPerFix CTC

DURAClone RE CTC 及び PerFix CTC試薬システムは、全血からのヒト血中循環腫瘍細胞の同定と単離が可能な、初のReady-to-Useフローサイトメトリー用試薬キットです。

 

この試薬システムの特長は:

  • 専門家によって検証されたマーカーの組み合わせと染色プロトコルによる高い特異性
  • 最大5 mLの全血サンプルの処理により高感度を実現
  • キットの抗体の組み合わせは蛍光補正が不要でデータ取得が容易
  • 抗体のピペッティングとサンプルの洗浄工程をなくし、ヒューマンエラーとデータのばらつきのリスクを低減
     (必要なのはスピンダウン1工程のみ)
  • 調製試薬のマイルドな化学的性質により、損なわれていないシングルセルDNAの高い回収率
  •  

    DURAClone RE CTCチューブ( C75112, 15テスト, RUO)

    Product PB KrO FITC PE ECD PC5.5 PC7 APC AF647 AF700 APC-
    AF700
    APC-
    AF750
    Quality
    Standard
     RE CTC Tube
     C75112
     15 tests, RUO
    DAPI - サイト
    ケラチン
    - - - CD45 EpCAM - - - - ISO
    9001-2015

    PB: Pacific Blue*、KrO: Krome Orange、AF647: Alexa Fluor* 64、AF700: Alexa Fluor* 700、APC-AF700: APC-Alexa Fluor* 700、APC-AF750: APC-Alexa Fluor* 750

     

    PerFix CTC (C75118, 15テスト, RUO)

     PerFix CTC Buffer 1  PerFix CTC Buffer 2  PerFix CTC Buffer 3
     Fixative Reagent
     1 vial, 1.9 mL
     100 μL/test
     Permeabilizing Reagent
     4 vials, 25 mL each
     6 mL/test
     Final 10X Solution
     1 vial, 26.3 mL, 10X conc.)
     100 μL/test
    * Alexa FluorとPacific Blueは、Thermo Fisher Scientific Inc.の登録商標です。

     

    フローサイトメトリーが専門外のユーザーに待ち望まれた技術です!

    PerFix CTC染色プロトコルは、大容量の全血から細胞を濃縮すると同時に、洗浄を繰り返すことが原因となる細胞ロスや、オペレータ依存の変動リスクを減らすようデザインされています。DURAClone RE CTCは、室温で安定性を維持するドライ状態の抗体がサンプルチューブの底部分にコーティングされた一体型のキットで、ピペッティング操作に伴うヒューマンエラーや試薬の経時変化による測定値のばらつきを最小化します。

    マーカー(DAPI、CD45、EpCAM、Cytokeratin)は、各蛍光標識間の漏れ込みが最小となる蛍光色素を慎重に選定した組み合わせで、白血球手段から希少なCTCを明確に識別します。

     

    同定と完全性に確信をもたらします

    DURAClone RE CTC と PerFix CTCシステムを使用することで、単離した目的細胞中に染色体のコピー数の差異が同じように現れることが実証され、CTCの単離に確信が持てます。

    単離されたCTCでは、質の高いDNAはゲノム完全性インデックス(GII)が2以上とされています1。下表はGII が2以上の3つのサンプルについて細胞収率を示しています。

     CTC (EpCAM+Cytokeratin+)
    サンプル 単離細胞 Thereof with GII* ≥ 2
    1 1 1
    2 3 1
    3 10 9

    * ゲノム完全性インデックス

    [1] Polzer B et al. EMBO molecular medicine vol. 6,11 (2014): 1371-86.

     

    データ例

    Product PB KrO FITC PE ECD PC5.5 PC7 APC AF647 AF700 APC-
    AF700
    APC-
    AF750
    Quality
    Standard
     RE CTC Tube
     C75112
     15 tests, RUO
    DAPI - サイト
    ケラチン
    - - - CD45 EpCAM - - - - ISO
    9001-2015

    DURAClone RE CTCチューブは、EpCAM及びCytokeratinの発現によってCTCを同定するようデザインされており、細胞サイズの不均一性に対応できるほか、マーカーの追加も可能です。

     

    フレキシブルに試薬の追加が可能

     選択性  標的細胞  当社が提供する提供する追加可能な試薬
     CD15  CTC クラスタ関連好中球 2  ・PE (IM1954U)
     ・Krome Orange (B01176)
     CD66b  CTC クラスタ関連好中球 2  ・APC-AF750 (B08756)
     CD24  乳がん幹細胞 CTC 3  ・PE (IM1428U, B92425)
     ・ECD (B12699)
     ・PC5.5 (B23133)
     ・APC-AF750 (B10738)
     CD44  乳がん幹細胞 CTC 3  ・PE (A32537)
     ・APC-AF750 (B30637)
     CD41  がん関連線維芽細胞 4  ・PE (IM1416U, A07781)
     ・ECD (6607117)
     CD61  がん関連線維芽細胞 4  ・PE (IM3605)
     ・PC5.5 (B21172)
     Vimentin  上皮間葉転換 CTC 5 -
    [2] Szczerba BM et al. Nature vol. 566,7745 (2019): 553-557.
    [3] Savelieva OE et al. International journal of molecular sciences vol. 21,8 2780. 16 Apr. 2020.
    [4] Duda DG et al. PNAS the United States of America vol. 107,50 (2010): 21677-82.
    [5] Wu S al. PloS one vol. 10,4 e0123976. 24 Apr. 2015.

     

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