セルソーティングの心配事〜デモで解消しませんか?〜

セルソーティングの心配事
〜デモで解消しませんか?〜

セルソーティングの心配事
〜デモで解消しませんか?〜

セルソーティングに関するよくある心配事 Top3は:

  1. 目的細胞をちゃんと分離するゲートができるか心配
  2. 操作が難しくてちゃんと分けられるか心配
  3. 細胞が死んだり状態が変わったりしないか心配

です。

卓上型セルソーターCytoFLEX SRTにはこれらの心配を解消するための先端テクノロジーが搭載されています。
セルソーターの導入を検討されている場合は、デモで性能をお確かめください!

1. 目的細胞をちゃんと分離するゲートができるか心配

「目的細胞をちゃんと分離するゲート設定」には、検出器の蛍光感度と分解能の良さが必要とされ、蛍光感度が十分でないセルソーターでは正しいソートゲート設定が難しくなります。そこで、蛍光感度、シグナルノイズ比(S/N比)が重要なポイントになります。下図のようにS/N比が高いCytoFLEX SRTのADP検出器の場合、弱陽性の細胞のソートゲートの設定も簡単です。

Sphero™ Rainbow Calibration Particles, 8 peaksをPMT搭載セルソーターとADP搭載セルソーター(CytoFLEX SRT)で測定した結果
Sphero Rainbow Calibration Particles, 8 peaksをPMT搭載セルソーターとADP搭載セルソーター(CytoFLEX SRT)で測定した結果。
左図(PMT検出器)では、ソートゲート内にネガティブビーズの混入の可能性が心配されますが、右図(ADP検出)では、ネガティブから十分に分離されているので、ソートゲート内へのネガティブビーズの混入の心配はありません。蛍光感度が高いセルソーターは、より正しく目的細胞をとらえたソートゲート設定が可能となり、ソーティング後の細胞の純度と回収率に影響を及ぼします。

蛍光補正によるアーティファクトも、CytoFLEX SRTなら最小化できます。市販されているフローサイトメーター用の蛍光標識抗体の20~30%が、FITC、PE、APCで標識されています。3レーザー搭載(Blue-Red-Yellow)のCytoFLEX SRTなら、FITC、PE、APCの3つの蛍光標識抗体を使用すると、各検出器間の蛍光補正は、ほぼ行わなくても測定ができます。蛍光補正によるアーティファクトを心配する必要がなくなります。

2. 操作が難しくてちゃんと分けられるか心配

セルソーターCytoFLEX SRTなら、セルアナライザーのように簡単に細胞解析ができ、そのあと、セルソーターの機能をONにすれば、いつでもソーティングできます。初めての方でも細胞解析から分取したいゲートを指定してセルソーティングまでを簡単に行えます。

セルソーターCytoFLEX SRTなら細胞解析から分取したいゲートを指定してセルソーティングまでを簡単に行えます。

3. 細胞が死んだり状態が変わったりしないか心配

CytoFLEX SRTは、一般的な細胞に最適化したノズルとシース圧を採用しました。細胞へのダメージを少なくしながらソーティングスピードを落とさないため、シース圧は比較的低圧である12PSIを採用し、大きめのノズル100μmを採用しました。
このため、シングルセルクローニングでも細胞の高い生存率が期待できると同時に、スループットも確保することが可能となります。

ソーティング後培養によって、播種されたウェルプレート上で細胞が増殖している様子の顕微鏡画像

ソーティング後培養によって、
播種されたウェルプレート上で細胞が
増殖している様子の顕微鏡画像

下図は溶血したヒト血液サンプルからTreg細胞とCD4+PD1+T細胞を2wayソーティングした時のソート前とソート後の各々の分取を、CytoFLEX SRTのセルアナライザー機能のみを使用して再解析したプロットです。ソート前(上)と比較して、Treg(中央)およびCD4+PD1+T細胞(下)のソート後の再解析では分取による高い純度になっていることと、ソーティングによって細胞のマーカー発現が変化するような細胞状態の変化はないことが分かります。

溶血したヒト血液サンプルからTreg細胞とCD4+PD1+T細胞を2wayソーティングした時のソート前とソート後の各々の分取を、CytoFLEX SRTのセルアナライザー機能のみを使用して再解析したプロット

  • 正しいディレイタイム設定とその維持の自動設定(自動ソートキャリブレーション)
    ⇒ サンプルの大きさにより微妙に変化する液滴のブレイクオフポイントを微調整し、回収率を向上
  • 蛍光感度が高く、分離(S/N)がよい検出器を搭載(ADPを用いたWDM検出器)
    ⇒ 目的細胞を的確にセルソーターに必要な性能とらえ、回収細胞の純度を向上
  • 一般的な細胞に最適なシース圧で細胞ストレスを最小化(最適なシース圧)
    ⇒ 簡単によりよいソーティング可能
セルソーターに必要な性能

セルソーターをご検討中の皆様、
上記の性能を備えたCytoFLEX SRTのデモで
ご心配事を解消しませんか?